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    人表皮角質形成細胞保存

    人表皮角質形成細胞保存

    產品時間:2020-07-16

    訪問量:111

    廠商性質:經銷商

    生產地址:進口、國產

    簡要描述:
    人表皮角質形成細胞保存在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
    品牌其他品牌CAS詳見說明書
    分子式詳見說明書純度詳見說明書
    分子量詳見說明書貨號GOY-Y3293
    規格5×105/瓶供貨周期現貨
    主要用途公司產品僅用于科研應用領域化工

    以下是訂購信息:

    產品名稱英文名稱貨號
     人表皮角質形成細胞保存 Human Skin: Normal Epidermal Keratinocytes GOY-Y3293

    人表皮角質形成細胞【Human Skin: Normal Epidermal Keratinocytes
         產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
     冷凍保存細胞之方法?
    冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
    冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

     

    實驗報告:

    一、分離與培養:產品僅供科研
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
    二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    下列是公司正在促銷產品:

    豬活化素A(ACV-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Sunitinib malate  341031-54-7  中文名:蘋果酸舒尼替尼  分子式:C26H33FN4O7 

    豬壞死因子αelisa試劑盒   豬壞死因子α試劑盒   規格型號:96T/48T   豬壞死因子α試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬壞死因子α試劑盒、豬壞死因子αeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Sarsasapogenin  126-19-2  中文名:菝葜皂苷元  分子式:C27H44O3 

    豬壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sulfadiazine  中文名:磺胺嘧啶  分子式:C10H10N4O2S  度:99.0%

    豬壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sulfaguanidine  中文名:磺胺脒  分子式:C7H10N4O2S  度:99.0%

    豬紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sulfamethazine  中文名:磺胺二甲嘧啶  分子式:C12H14N4O2S  度:99.0%

    小鼠羥甲基賴酸(mouse CML)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Dioscin  19057-60-4  中文名:薯蕷皂苷  分子式:C45H72O16  度:98.5%  關鍵詞:  溶血; 細胞毒; 抗真菌; 薯蕷屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    小鼠強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Gliclazide  中文名:格列齊特  分子式:C15H21N3O3S 

    小鼠前心肽elisa試劑盒   小鼠前心肽試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠前心肽試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠前心肽試劑盒、小鼠前心肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Glycoursodeoxycholic acid  64480-66-6  中文名:甘氨熊脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5 

    小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Gliclazide  21187-98-4  中文名:格列齊特  分子式:C15H21N3O3S  度:98.0%  關鍵詞: 

    小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Glaucogenin C mono-D-thevetoside  中文名:  分子式:C28H40O9  度:98.0%

    線粒體復合物II蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式:C12H10N2O2S  度:98.0%

    線粒體復合物II蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式:C8H9NO2  度:98.0%   

    線粒體復合物III蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名:2-氨基-4-甲基苯并噻唑  分子式:C8H8N2S  度:98.0%   

    線粒體復合物III蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式:C13H10N2O3  度:98.0%

    線粒體促凋亡蛋白 (SMAC)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5  度:98.0%  關鍵詞:

    人信號素4D(SEMA4D)酶聯吸附測定試劑盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit                    3,3-Dimethylacrylic acid  中文名:千里光酸  分子式:C5H8O2 

    人心肌錨蛋白重復域1elisa試劑盒   人心肌錨蛋白重復域1試劑盒   規格型號:96T/48T   人心肌錨蛋白重復域1試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人心肌錨蛋白重復域1試劑盒、人心肌錨蛋白重復域1 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     3-(Boc-Amino)piperidine  中文名:  分子式:C10H20N2O2 

    人相關抗原(TAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名:  分子式:C19H16FNO  度:98.0%

    人腺苷三0酸結合盒轉運體G1(ABCG1)酶聯吸附測定試劑盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名:  分子式:C19H20N4  度:98.0%

    人腺苷三0酸結合盒轉運體A1(ABCA1)酶聯吸附測定試劑盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit                 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名:  分子式:C19H20N4

    人表皮角質形成細胞保存培養操作:

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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