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    人脈絡膜血管平滑肌細胞培養

    人脈絡膜血管平滑肌細胞培養

    產品時間:2020-07-16

    訪問量:48

    廠商性質:經銷商

    生產地址:進口、國產

    簡要描述:
    人脈絡膜血管平滑肌細胞培養在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
    品牌其他品牌CAS詳見說明書
    分子式詳見說明書純度詳見說明書
    分子量詳見說明書貨號GOY-Y3288
    規格5×105/瓶供貨周期現貨
    主要用途公司產品僅用于科研應用領域化工

    細胞培養操作規程:

    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    以下是訂購信息:

    產品名稱英文名稱貨號
     人脈絡膜血管平滑肌細胞培養 Human Eyes: Normal Choroidal Vascular Smooth Muscle CellsGOY-Y3288

    人脈絡膜血管平滑肌細胞【Human Eyes: Normal Choroidal Vascular Smooth Muscle Cells
         產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
     冷凍保存細胞之方法?
    冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
    冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

     

    培養操作:
    產品僅供科研1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

    實驗報告:

    一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
    二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    下列是公司正在促銷產品:

    豬狂犬病毒抗體(RV-abELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Stigmasta-5,8-dien-3-ol  中文名:  分子式:C29H48O 

    豬口蹄疫病毒(FMDVELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Stigmasta-5,8-dien-3-ol  570-72-9  中文名:  分子式:C29H48O  度:關鍵詞:  豆甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    豬可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Stigmasta-5,8-dien-3-ol  570-72-9  中文名:  分子式:C29H48O 

    豬可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Stellasterol  2465/11/4  中文名:星魚甾醇  分子式:C28H46O  度:96.0%  關鍵詞:  麥角甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    豬可溶性內皮生長因子受體2elisa試劑盒   豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒   規格型號:96T/48T   豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬可溶性內皮生長因子受體2試劑盒、豬可溶性內皮生長因子受體2eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Stigmastane-3,6-diol  中文名:  分子式:C29H52O2  度:%

    小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Glycodeoxycholic acid  360-65-6  中文名:甘氨脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5  度:98.0%  關鍵詞:  膽烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  中文名:  分子式:C29H58O5 

    小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Cryptanoside A  98570-81-1  中文名:  分子式:C30H42O10 

    小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Glycodeoxycholic acid  360-65-6  中文名:甘氨脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5 

    小鼠熱休克蛋白60   英文名稱:   Heat shock protein 60   規格:   48T/96T   英文縮寫:   Hsp-60  Mepivacaine  96-88-8  中文名:甲哌卡因  分子式:C15H22N2O  度:98.0%  關鍵詞:

    小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole  中文名:  分子式:C16H21N3O4S  度:98.0%

    小鼠(mouse NO)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名:  分子式:C6H5N3 

    小鼠 IgG(mouse IgG)   作用:   ELISA   規格:   96T   美國 ADI  Azilsartan  147403-03-0  中文名:阿齊沙坦  分子式:C25H20N4O5  度:98.0%  關鍵詞: 

    小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用:   ELISA   規格:   96T   美國 R&D  Azathioprine  中文名:硫唑嘌呤  分子式:C9H7N7O2S  度:98.0%

    小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用:   ELISA   規格:   96T   美國 Phoenix  Otophylloside F  250217-73-3  中文名:青陽參苷分子式:C48H76O16  度:95.0%  關鍵詞:  抗癲癇; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    人游離睪(F-TESTO)酶聯吸附測定試劑盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名:  分子式:C26H31N3O8 

    人優球蛋白(EL)酶聯吸附測定試劑盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit  3,3-Dimethylacrylic acid  中文名:千里光酸  分子式:C5H8O2  度:98.0%

    人脈絡膜血管平滑肌細胞培養人隱花色素1(CRY1)酶聯吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit  3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名:3,3'-二氨基二苯砜  分子式:C12H12N2O2S 

    人抑絲蛋白1(PFN1)酶聯吸附測定試劑盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit                 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名:  分子式:C10H7F3N2O 

    人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名:  分子式:C10H14O5

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